检测方法

为了充分发挥成像仪或扫描仪检测功能,选择适合的标记或染色方案能够提高检测的灵敏度和动态范围。

1975年,英国生物学家Edwin Southern开辟了使用同位素标记核苷酸用于DNA中特定序列的检测的方法,即Southern Blot法,同时第一次采用Protran硝酸纤维素膜。

如今基于化学发光和荧光的光发射技术越来越广泛,因为它更安全、经济、以及具有定量精确度。


当存储能量的化学试剂发出光信号时就是化学发光,这种试剂通常稳定存在且不会发射光,一旦和特定性的酶进行相互作用之后,能够转换成一种发光产物。在绝大多数当代的ECL系统中,辣根过氧化物酶(HRP)偶联到二抗上用于转化其底物,便能产生光信号。

Amersham ECL是业界最早诞生的化学发光试剂品牌(1990年),提供从低丰度到高丰度蛋白检测限、发光时间、不同包装规格及最长效期的ECL试剂,满足您的不同需求。

ECL五种全系列:ECL Start, ECL, ECL Prime, ECL Select 和ECL Plex.

荧光素分子吸收光时会产生荧光反应。在基底状态下,荧光素不会发射光,当遇到光时(如激发光),其能量水平会升到一个短暂但不稳定的激发状态。当荧光素回到基底状态时,便释放出比激发光能量更低、波长更长的发射光。如果选择的CyDye荧光染料是光谱解析的(比如,发射不同波长的光),可用于标记以允许多重检测,即在一个样品中同时检测多个靶点。

化学荧光指的是化合物和/或酶产生的荧光。在酶和底物之间的催化反应,导致在反应位点形成一种荧光产物,同时导致一个放大的信号。

比色法

使用染料(如考马斯蓝和银染)的比色法目前仍广泛应用于显现和检测蛋白质。银能够用于检测低至亚纳克量的蛋白质。

放射性同位素检测

虽然已出现了替代基于放射性同位素的系统,但放射性同位素如32P, 33P, 35S, 14C, 3H 和125I仍在一些领域具有检测优势。因其高灵敏性、快速,加之放射性系统与磷屏的结合,经常用于Soutern和Northern印迹实验。