基因编辑

将CRISPR-Cas9系统用于基因编辑应用

古生菌CRISPR-Cas9系统的研究发现,酿脓链球菌的CRISPR—Cas9系统最适合用于哺乳动物基因编辑。该系统包括三个必须组分:

  • Cas9核酸酶;
  • crRNA引导Cas9打靶;
  • tracrRNA和Cas9以及crRNA形成稳定的复合物。
  • 哺乳动物细胞双链DNA被特异切割后,可以通过非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)机制修复该损伤。非同源末端连接往往会导致插入或删除,导致无义突变或移码突变,从而造成蛋白无法表达,造成永久基因敲除。

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